Trab tal-kollaġen tal-ħut pur

Il-karatteristika ewlenija tat-tixjiħ tal-ġilda hija t-telf u t-tqassim strutturali tal-kollaġen fis-saff tad-dermis. Il-peptidi tal-kollaġen saru komponent ewlieni biex jissostitwixxu, jissupplimentaw u jattivaw is-sinteżi tal-kollaġen endoġenu minħabba l-piż molekulari żgħir tagħhom, il-bijokompatibilità għolja u l-assorbiment faċli mill-ġilda.

Madankollu, bħala l-akbar organu ta 'barriera fil-ġisem tal-bniedem, l-istruttura ta' "tajn tal-briks" tal-istratum corneum tal-ġilda (iffurmata minn keratinoċiti bħala briks u lipidi interċellulari bħala tajn) tifforma barriera densa ta 'permeazzjoni, li tagħmilha diffiċli għal aktar minn 90% tal-ingredjenti attivi lokali biex jippenetraw l-istratum corneum u jilħqu s-saff tad-dermis. Għal FCP, l-assorbiment transdermali jiffaċċja dilemma doppja: l-ewwelnett, il-piż molekulari l-aktar jaqbeż il-limitu ta 'penetrazzjoni ta' 500Da, li huwa faċilment interċettat mill-istratum corneum; It-tieni nett, il-ktajjen tal-peptidi għandhom polarità qawwija u solubilità fqira tal-lipidi, li jagħmluha diffiċli biex tippenetra l-bisaff tal-lipidi. Id-dejta turi li r-rata ta 'assorbiment transdermali ta' preparazzjonijiet topiċi FCP ordinarji hija inqas minn 5%, u l-biċċa l-kbira tal-ingredjenti jibqgħu biss fuq il-wiċċ tal-ġilda biex jeżerċitaw effetti moisturizing, ma jistgħux jiksbu effetti anti-tixjiħ fil-fond.

L-effiċjenza transdermali ta 'FCP mhijiex determinata minn fattur wieħed, iżda pjuttost proċess ta' logħba dinamika li fih il-piż molekulari, is-sors u l-matriċi jinteraġixxu u jikkoordinaw, li jiffurmaw il-loġika ċentrali ta '"politika ta' penetrazzjoni tal-ġilda":
Piż molekulari: il-'limitu fiżiku' li jiddetermina l-probabbiltà ta' permeazzjoni. Iktar ma jkun żgħir il-piż molekulari, iktar ikun faċli li jippenetra, iżda jekk ikun żgħir wisq, huwa suxxettibbli għal diżattivazzjoni u stabbiltà fqira;
Sors: Il-bażi ġenetika li tiddetermina l-istruttura u l-attività tal-ktajjen tal-peptidi. Is-sekwenzi tal-peptidi u l-kompożizzjonijiet tal-aċidu amminiku ta 'sorsi differenti tal-ħut ivarjaw ħafna, u jaffettwaw direttament l-affinità tagħhom mal-ġilda;

L-essenza tal-logħba bejn it-tlieta hija bilanċ dinamiku ta 'effiċjenza ta' permeazzjoni, attività bijoloġika u stabbiltà: issegwi l-piż molekulari żgħir aħħari jista 'faċilment iwassal għal telf ta' attività; Li tiddependi biss fuq-riżorsi ta' kwalità għolja ma tistax tegħleb l-ostakli u l-limitazzjonijiet; Li tiddependi biss fuq l-ottimizzazzjoni tal-matriċi m'għandhiex appoġġ attiv tal-katina tal-peptidi. Għalhekk, l-analiżi tal-mekkaniżmi indipendenti u r-regoli kollaborattivi tal-logħob tat-tlieta hija ċ-ċavetta biex tkisser l-għonq tal-flixkun tal-konsenja tad-droga transdermali FCP u tiżviluppa formuli effiċjenti għall-kura tal-ġilda, li hija ta 'sinifikat kbir għall-promozzjoni tal-iżvilupp xjentifiku u preċiż tal-kura tal-ġilda tal-peptide tal-kollaġen.

Il-ġilda hija magħmula minn tliet saffi: epidermide, dermis, u tessut taħt il-ġilda. Ir-reżistenza tal-qalba tal-kunsinna transdermali FCP tiġi mill-epidermide, speċjalment l-istratum corneum.

Stratum corneum: Is-saff l-aktar 'il barra tal-epidermide, magħmul minn 15-20 saff ta' keratinoċiti nukleati ċatti u lipidi interċellulari, bi ħxuna ta 'madwar 10-40 μ m. Iċ-ċelloli tal-keratin huma sinjuri fil-keratin, u l-lipidi interċellulari huma komposti minn ċeramidi, kolesterol u aċidi grassi fi proporzjon ta '1:1:1, li jiffurmaw struttura densa b'żewġ saffi tal-lipidi, li hija "l-ewwel linja ta' difiża" kontra l-infiltrazzjoni ta 'sustanzi esterni.

Saff trasparenti/saff granulari/saff spinous/saff bażali: Taħt l-istratum corneum, hemm żieda fl-ispazju interċellulari, tnaqqis fil-kontenut tal-lipidi, u tnaqqis sinifikanti fir-reżistenza. Is-saff bażali huwa s-saff taċ-ċelluli staminali epidermali, u FCP li jilħaq is-saff bażali jista 'jattiva d-divrenzjar taċ-ċelloli staminali u jippromwovi s-sintesi tal-kollaġen.

Trab tal-kollaġen tal-ħut purjippenetra l-barriera tal-ġilda prinċipalment permezz ta 'tliet mogħdijiet, b'effiċjenza dejjem tonqos:

Mogħdija interstizjali: l-aktar mogħdija importanti, li tammonta għal aktar minn 90% tal-volum transdermali totali. FCP jippenetra d-distakk bi saffi tal-lipidi bejn il-keratinoċiti, b'dijametru tal-vojt ta 'madwar 20-50nm, u huwa l-kanal ewlieni għall-penetrazzjoni tal-peptide ta' molekula żgħira.

Trasversali mogħdija ċellulari: FCP jippenetra direttament il-keratinoċiti u jeħtieġ li jgħaddi mill-membrana taċ-ċellula, ċitoplasma u membrana nukleari suċċessivament, b'reżistenza kbira. Huwa adattat biss għal molekuli żgħar b'solubilità tal-lipidi estremament għolja.

Passaġġ aċċessorju: Jippenetra permezz tal-follikuli tax-xagħar, glandoli tal-għaraq, u glandoli sebaceous, li jammontaw għal inqas minn 10%, iżda jista 'jevita l-istratum corneum u jilħaq direttament is-saff tad-dermis, u għandu rwol importanti biex jissupplimenta l-penetrazzjoni ta' peptidi molekulari kbar.

Fl-1990, Jan Bos u Marcus Meinardi ipproponew formalment ir-regola ta '500 Dalton: sustanzi b'piż molekulari li jaqbeż il-500 Da huma diffiċli biex jippenetraw l-istratum corneum ta' ġilda b'saħħitha; L-effiċjenza tal-permeazzjoni ta 'sustanzi b'piż molekulari inqas minn 500Da tiżdied b'mod sinifikanti hekk kif il-piż molekulari jonqos. Il-mekkaniżmu ewlieni ta 'din ir-regola huwa li l-ispazju interstizjali bejn is-saffi tal-lipidi tal-istratum corneum huwa limitat, u sustanzi molekulari kbar ma jistgħux jgħaddu minħabba tfixkil steriku, u molekuli kbar polari huma diffiċli biex jinħall fis-saff tal-lipidi.

Għal FCP, din ir-regola hija r-restrizzjoni tal-penetrazzjoni ewlenija:

Molecular weight>3000Da: kompletament ma jistax jippenetra l-istratum corneum, kapaċi biss jifforma film moisturizing fuq il-wiċċ tal-ġilda;

1000-3000Da: ammont żgħir ta 'penetrazzjoni, prinċipalment permezz tal-mogħdija aċċessorja, rata ta' assorbiment transdermali<5%;

500-1000Da: permeabilità moderata, prinċipalment permezz tal-mogħdija ta 'l-ispazju interċellulari, rata ta' assorbiment transdermali ta '5% -15%;

<500Da: Efficient penetration, can quickly penetrate the stratum corneum to reach the dermis layer, with a transdermal absorption rate of>20%.

Minbarra l-limitazzjonijiet tal-piż molekulari, il-konsenja transdermali tal-FCP tiffaċċja wkoll żewġ ostakli ewlenin, li jkomplu jaggravaw il-kumplessità tal-logħba:

Polarità qawwija u solubilità fqira tal-lipidi: FCP fih ammont kbir ta 'gruppi idrofiliċi amminiċi u karbossiliċi, b'koeffiċjent ta' partizzjoni taż-żejt-ilma (LogP)<-1, making it difficult to dissolve in the lipids of the stratum corneum and easily excluded from the lipid bilayer.

Ktajjen tal-peptidi huma faċilment degradabbli: Proteases jeżistu fuq il-wiċċ tal-ġilda u stratum corneum, li jistgħu jiddegradaw FCP mhux protett, li jwasslu għal telf ta 'attività; Sadanittant, peptidi ta' molekula żgħira (<300Da) have poor stability and are prone to aggregation and inactivation.

Il-molekula ultra żgħira FCP hija magħmula prinċipalment minn dipeptidi u tripeptidi (bħal Gly Pro, Gly Pro Hyp), b'piż molekulari kkonċentrat bejn 200-500Da, li jilħaq bis-sħiħ il-limitu ta 'penetrazzjoni ta' 500Da, u jista 'jippenetra malajr l-istratum corneum. Dejta sperimentali turi li l-<500Da ultra small molecule peptide derived from cod skin can achieve a transdermal absorption rate of 35% within 24 hours and reach the dermis layer within 1 hour.

Iżda d-difetti ewlenin tagħha huma attività insuffiċjenti u stabbiltà fqira: ktajjen qosra tal-peptidi jirriżultaw f'numru żgħir ta 'siti attivi (Gly Pro Hyp, sekwenza ta' sinjal ewlieni għas-sintesi tal-kollaġen), li jagħmilha diffiċli biex jiġu attivati ​​b'mod effettiv fibroblasti; Sadanittant, il-polarità tal-peptidi ta 'molekula ultra żgħar hija estremament qawwija, li tagħmilhom faċli biex jinfirxu u jitilfu fuq il-wiċċ tal-ġilda, u faċilment degradati mill-proteases tal-ġilda. Meta applikata topikament waħdu, ir-rata ta 'żamma tal-attività hija inqas minn 30%.

500-1000Da hija l-firxa ottimali ta 'piż molekulari għal FCP, magħrufa bħala l-"medda ta' permeazzjoni tad-deheb". L-FCP f'din il-firxa huwa magħmul l-aktar minn peptidi qosra ta '5-10 aċidi amminiċi, li għandhom tliet vantaġġi ewlenin:

Effiċjenza ta 'penetrazzjoni moderata: b'piż molekulari taħt 1000Da, tista' tippenetra permezz tal-mogħdija ta 'l-ispazju interċellulari, b'rata ta' assorbiment transdermali ta '24 siegħa ta' madwar 15%, li tissodisfa r-rekwiżiti ta 'effikaċja;

Attività ottimali: li fih 3-5 sekwenzi attivi Gly Pro Hyp, jista 'jorbot b'mod effiċjenti mar-riċetturi tal-wiċċ tal-fibroblasti u jattiva mogħdijiet ta' sinjalazzjoni tas-sinteżi tal-kollaġen (bħal mogħdija TGF - /Smad);

Stabbiltà tajba: Il-katina tal-peptidi għandha tul moderat u mhix faċilment aggregata jew diżattivata. Jista 'jibqa' stabbli sa 6 xhur f'soluzzjoni milwiema b'rata ta 'żamma ta' attività ta 'aktar minn 80%.

Il-piż molekulari medjuTrab tal-kollaġen tal-ħut purkatina hija relattivament twila u fiha siti attivi multipli, b'attività bijoloġika eċċellenti u stabbiltà. Madankollu, hija limitata mir-regola 500Da u diffiċli biex tippenetra l-istratum corneum. Il-penetrazzjoni tagħha tiddependi prinċipalment fuq appendiċi bħal follikuli tax-xagħar u glandoli tal-għaraq, li jammontaw għal inqas minn 0.1% tal-erja totali tal-ġilda, li tirriżulta f'rata ta 'assorbiment transdermali ta' 24 siegħa ta 'madwar 5% biss, bil-biċċa l-kbira tal-komponenti jibqgħu fuq il-wiċċ tal-istratum corneum.

Il-valur ewlieni tal-peptidi ta 'piż molekulari medju huwa moisturizing u tiswija tal-wiċċ: jistgħu jiffurmaw film moisturizing dens fuq il-wiċċ tal-ġilda, jissakkru fl-umdità, u jtejbu n-nixfa u l-ħruxija tal-ġilda; Fl-istess ħin, jista 'jsewwi l-ħsara tal-lipidi lill-istratum corneum u jtejjeb il-funzjoni tal-barriera tal-ġilda. Iżda minħabba l-inkapaċità li tilħaq is-saff tad-dermis, l-effetti fil-fond bħalma huma l-anti-tixjiħ u s-soda huma dgħajfa.

Teknoloġija ta 'idroliżi enżimatika mmirata: qtugħ preċiż ta' ktajjen tal-peptidi

Bl-użu ta 'protease kompost (trypsin + papain + elastase) minflok enzima waħda, billi tikkontrolla t-temperatura ta' idroliżi enżimatika (40-50 grad), ħin (2-4 sigħat), u ammont ta 'żieda ta' enzimi (0.5% -1%), il-ktajjen tal-peptidi tal-kollaġen huma mqassma b'mod selettiv, li jirriżulta f'aktar minn 70% ta 'segmenti ta' peptide ikkonċentrat f'firxa ta 'deheb. 500-1000Da. Id-dejta turi li l-proporzjon ta 'segmenti peptidi 500-1000Da fil-ġilda tal-merluzz FCP ippreparat b'idroliżi enżimatika diretta hija 82%, u r-rata ta' assorbiment transdermali hija 60% ogħla minn dik ta 'prodotti enżimatiċi ordinarji.

Teknoloġija tas-separazzjoni tal-membrana: screening gradat, kontroll preċiż tal-piż molekulari

Using ultrafiltration membranes (molecular weight cut-off of 500Da, 1000Da, 3000Da) to perform graded filtration of enzymatic hydrolysis products, removing large molecule impurities and ineffective peptide segments of ultra small molecules, and accurately enriching active peptide segments of 500-1000Da. The FCP purified by membrane separation has a molecular weight distribution uniformity (PDI) of ≤ 1.3, an active sequence retention rate of>95%, u l-istabbiltà transdermali mtejba b'mod sinifikanti.